1. Lekola ho monya ha tharollo ea RNA

Absorbance ho 280, 320, 230, le 260 nm e emela litekanyetso tsa nucleic acid, background (solution turbidity), mahloriso a letsoai, le lintho tse phelang tse kang protheine, ka ho latellana.Ka kakaretso sheba feela OD260/OD280 (Karolelano, R).Ha 1.8 ~ 2.0, re nahana hore tšilafalo ea protheine kapa lintho tse ling tse phelang ho RNA li ka mamelloa, empa hoa lokela ho hlokomeloa hore ha Tris e sebelisoa e le buffer ho lemoha ho monya, boleng ba R bo ka ba bo boholo ho feta 2 (ka kakaretso e lokela ho ba <2.2).Ha R<1.8, tšilafalo ea protheine kapa lintho tse ling tse phelang ka tharollo e totobetse haholoanyane, 'me qetello ea RNA e ka khethoa ho ea ka litlhoko.Ha R> 2.2, ho bolela hore RNA e entsoe ka hydrolyzed hore e be nucleic acid e le 'ngoe.
 
2.Electrophoretic mohlala oa RNA
Ka kakaretso, gel ea denaturing e sebelisetsoa RNA electrophoresis, empa haeba e le feela bakeng sa ho lemoha boleng ba RNA, gel ea denaturing ha e hlokahale, 'me gel e tloaelehileng ea agarose e ka sebelisoa.Sepheo sa electrophoresis ke ho lemoha botšepehi ba lihlopha tsa 28S le 18S le karolelano ea tsona, kapa botšepehi ba mRNA smear.Ka kakaretso, haeba lihlopha tsa 28S le 18S li khanya, li hlakile, li bile li le bohale (ho bua ka mahlakoreng a lihlopha li hlakile), 'me khanya ea 28S e feta habeli ea sehlopha sa 18S, re nka hore boleng ba RNA bo botle.
Tse ka holimo ke mekhoa e 'meli eo re tloaetseng ho e sebelisa, empa ha ho le ea mong oa mekhoa ena e 'meli e ka re bolellang ka ho hlaka hore na ho na le RNase e setseng tharollong ea RNA.Haeba ho na le palo e nyenyane haholo ea RNase ka tharollo, ho thata ho rona ho e lemoha ka mokhoa o ka holimo, empa boholo ba liketso tse latelang tsa enzymatic li etsoa ka holimo ho likhato tse 37 le nako e telele.Ka tsela ena, haeba ho na le palo e nyenyane haholo ea RNase ka tharollo ea RNA, joale ho tla ba le tikoloho e loketseng haholo le nako ea ho bapala karolo ea bona litekong tse latelang, 'me ha e le hantle teko e tla bata ka nako ena.Ka tlase re kenyelletsa mokhoa o ka netefatsang hore na ho na le RNase e setseng ka tharollo ea RNA.
 
3. Teko ea ho boloka mocheso
Ho latela mohlala oa mahloriso, hula tse peli tsa 1000 ng RNA ho tsoa tharollong ea RNA 'me u e kenye ho 0.5 ml centrifuge tube,' me u e tlatse ka pH 7.0 Tris buffer ho kakaretso ea 10 ul, ebe u tiisa sekoahelo sa tube.Kenya e 'ngoe ea tsona sebakeng sa ho hlapa metsi ka mocheso o sa feleng ho 70 ° C 'me ue boloke e futhumetse bakeng sa 1 h.Karolo e 'ngoe e ne e bolokiloe ka sehatsetsing sa -20 ° C bakeng sa 1 h.Ha nako e felile, tlosa lisampole tse peli tsa electrophoresis.Ka mor'a hore electrophoresis e phethoe, bapisa lihlopha tsa electrophoretic tsa tse peli.Haeba lihlopha tsa tse peli li tsitsitse kapa li se na phapang e kholo (ho hlakile hore lihlopha tsa bona li boetse li finyella maemo a mokhoa oa 2), ho bolela hore ha ho na tšilafalo ea RNase e setseng ka tharollo ea RNA, 'me boleng ba RNA bo molemo haholo.Ho fapana le hoo, haeba sampole e kentsoeng ka 70 ° C e bontša ho senyeha ho totobetseng, ho bontša hore ho na le tšilafalo ea RNase ka tharollo ea RNA.
 
2 Mekhoa ea liteko le mekhoa ea ho ntša RNA
Mathata ao hangata re kopanang le ona ha re ntša RNA ke: (1) Kotulo ea RNA e tlaase;(2) RNA e na le tšilafalo e tebileng ea letsoai;(3) RNA e na le tšilafalo e tebileng ea metsoako ea lintho tsa tlhaho;(4) ho senyeha ha mohlala le mathata a mang
 
1. Ka tloaelo ho sebelisoa kakaretso ea RNA reagents
Mokhoa oa guanidine isothiocyanate le mokhoa oa Trizol ke mekhoa e sebelisoang ka ho fetisisa bakeng sa ho ntšoa ha RNA eohle ho tloha liseleng tsa liphoofolo le liseleng tsa liphoofolo.E loketse ka ho khetheha bakeng sa lisampole tse nyane le li-tissue tse thata haholo ho li ntša, joalo ka ho ntšoa ha RNA kaofela ho tsoa letlalong la mmutla le lisele tse hokahaneng tsa liphoofolo;Ho phaella moo, Trizol, e le mokhoa o akaretsang oa lysis reagent, e ka boela ea sebelisoa bakeng sa ho ntša lisele tsa semela, libaktheria, li-fungus le lisele tse ling.Bakeng sa lithane tsa semela tse nang le polysaccharides le polyphenols, joalo ka camellia oleifera, makhasi a tee, rapeseed, joalo-joalo, mokhoa oa CTAB le ona o ka sebelisoa ho ntša RNA kaofela.

E le mokhoa o tloaelehileng, mokhoa oa li-column tse peli o boetse o tumme haholo ka lebaka la ts'ebetso ea oona e tloaelehileng ea mocheso, ha ho hlokahale ho eketsa RNase, le polokeho-ha ho na chloroform, phenols le li-reagents tse ling tsa manyolo bakeng sa ho ntšoa.(lihlahisoa tse khothalletsoang )