Karolo e ikhethang ea karabelo ea PCR ke matla a eona a maholo a ho holisa le kutlo e phahameng haholo.E le ho ntlafatsa ts'ebetso ea PCR le katleho ea ho lemoha, re ikemiselitse ho ntlafatsa matla a ho hōlisa PCR le kutloisiso ea ho lemoha, empa hlooho e bohloko e ntse e tsoela pele ho etsa liteko.Hangata lintho tse fosahetseng li etsahala, 'me palo e nyane haholo ea tšilafalo ea lihlahisoa kapa sehlahisoa sa PCR e ka baka maikutlo a fosahetseng tekong.
Mefuta e mehlano ea tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR
Ho na le mabaka a mangata a tšilafalo ea PCR, e ka aroloang ka mekhahlelo e latelang:
Tšilafalo ea mohlala e bakoa haholo-holo ke tšilafalo ea setshelo bakeng sa ho bokella mohlala, kapa ha mohlala o behiloe, o tsoa ka har'a sets'oants'o ka lebaka la ho tiisoa ho hlephileng, kapa mohlala o khomaretsoe ka ntle ho sets'oants'o, e leng se bakang tšilafalo;Tšilafalo e lebisa tšilafalo pakeng tsa mehlala;mefuta e meng ea likokoana-hloko, haholo-holo livaerase, li ka hasana ka li-aerosols kapa tsa etsa li-aerosol, e leng se bakang ho silafala ka bobeli.
Lebaka le ka sehloohong ke hore nakong ea ho lokisoa ha li-reagents tsa PCR, sethunya sa mohlala, setshelo, metsi a mabeli a silafetseng le litharollo tse ling li silafalitsoe ke template ea PCR nucleic acid.
Lilaboratoring tsa baeloji ea limolek'hule le lilaboratoring tse ling tse sebelisang li-plasmid tse entsoeng ka maiketsetso e le li laola hantle, bothata ba ho silafala ha plasmid e entsoeng ka maiketsetso le bona bo atile.Hobane litaba tsa cloning plasmid ka bophahamo ba yuniti li phahame haholo, 'me lisebelisoa tse ngata le li-reagents lia hlokahala ts'ebetsong ea tlhoekiso,' me plasmid e liseleng tse phelang e na le monyetla oa ho silafala ka lebaka la kholo e matla le bokhoni ba ho ikatisa ba lisele tse phelang.
Tšilafalo ea lihlahisoa tse holisitsoeng ke bothata bo atileng haholo ba ts'ilafalo karabelong ea PCR.Hobane palo ea kopi ea sehlahisoa sa PCR e kholo (ka kakaretso likopi tse 1013/ml), e leng holimo haholo ho feta moeli oa nomoro ea kopi ea PCR, palo e nyane haholo ea tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR e ka baka maikutlo a fosahetseng.
Tšilafalo ea aerosol ke mokhoa o ka bang teng oa tšilafalo ea lihlahisoa tsa PCR, hape ke eona e bonolo ka ho fetesisa ho hlokomolohuoa.E thehoa ke khohlano pakeng tsa metsi le moea.Ka kakaretso, tšilafalo ea aerosol e ka thehoa ha sekoahelo se buloa, ha sampuli e le aspirated, kapa esita le ha tube ea reaction e sisinyeha ka matla.Ho ea ka lipalo, karoloana ea aerosol e ka ba le likopi tsa 48,000, kahoo tšilafalo e bakoang ke eona ke bothata bo lokelang ho hlokomeloa ka ho khethehileng.
Haholo-holo, lilaboratori tsa liteko hangata li sebelisa para e tšoanang ea li-primers ho leka mofuta o itseng.Ha nako e ntse e ea, palo e kholo ea tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR e tla etsahala sebakeng sa laboratori.Hang ha tšilafalo e joalo e etsahala, ho thata ho e felisa ka nako e khutšoanyane.
Bakeng sa mefuta e meraro ea pele ea tšilafalo, re ka sebelisa mekhoa e sebetsang ea ho qoba, empa tšilafalo e bakoang ke lihlahisoa tsa PCR e thata ho thibela, haholo-holo kahong ea lilaboratori tse sa tloaelehang tsa PCR.Ts'ebetsong ea PCR, ha ntlha ea pipette e monya le ho otla mokelikeli, 'me sekoahelo sa tube sa PCR se buloa, ho tla thehoa aerosol.Ho thata ho felisa limolek’hule tsa DNA tse tsamaisoang ke aerosol (aerosol e le ’ngoe e ka nkang DNA e likete tse mashome) hobane li phaphamala moeeng.Hang ha potoloho e latelang ea liteko tsa PCR e hlahisoa, ho tla etsahala lintho tse fosahetseng.
Joalo ka ha ho bonts'itsoe setšoantšong se ka tlase, taolo e mpe e boetse e holisitse sehlopha se ts'oanang sa thahasello:
Karolo ea pele ea taba ena ea tšilafalo le thibelo ea PCR e hlahisoa mona.Khatiso e latelang e tla u tlisetsa karolo ea bobeli "Thibelo ea tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR", kahoo lula u mametse!
Nako ea poso: Jul-25-2017
