1: Fetola lisebelisoa tsa liteko ka nako

Theha (NTC) taolo e mpe 'me u e phete hangata.Hang ha ho fumanoa hore ho na le tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR ka laboratoring, khutlisetsa lisebelisoa tsohle tsa liteko ka nako.Joalo ka: hlapolla bocha le ho lokisa li-primers, nchafatsa ntlha ea pipette, EP tube, ddH2O, joalo-joalo, nkela pipette e ncha, 'me u alime lilaboratori tse ling ka nakoana ho etsa liteko tsa PCR.Laborator e silafalitsoeng e tla kenngoa moea 'me e khantšitsoe ka mahlaseli a ultraviolet ho fihlela tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR e felile pele e tsoela pele ka liteko.

2: Eketsa nako ea ho pepeseha ha UV

Ke habohlokoa ho hlokomela hore ho tlosa tšilafalo ea DNA, mahlaseli a tloaelehileng a mahlaseli a kotsi a lokela ho atolosoa ka lihora tse 2 ho feta tloaelo.Leha ho le joalo, phello ea mahlaseli a UV ho tlosa likhechana tse nyane (ka tlase ho 200bp) tsa tšilafalo ea DNA e ntse e se ntle.

Ultraviolet wavelength (nm) hangata ke 254/300nm, 'me e lekane ho khantša metsotso e 30.Hoa lokela ho hlokomeloa hore ha u khetha UV ho felisa tšilafalo ea lihlahisoa tse setseng tsa PCR, bolelele ba sehlahisoa sa PCR le ho ajoa ha metheo ka tatellano ea sehlahisoa ho lokela ho nahanoa.Mahlaseli a UV a sebetsa feela bakeng sa likhechana tse telele tse ka holimo ho 500 bp, 'me ha a na phello e fokolang likarolong tse khutšoanyane.

Nakong ea mahlaseli a UV, metheo ea pyrimidine sehlahisoa sa PCR e tla theha dimers.Li-dimers tsena li ka felisa katoloso, empa ha se li-pyrimidine tsohle tse ka har'a ketane ea DNA tse ka etsang dimers, 'me mahlaseli a UV a ka senya li-dimers..Tekanyo ea sebopeho sa dimer e ipapisitse le leqhubu la UV, mofuta oa pyrimidine dimer le tatelano ea li-nucleotide tse bapileng le sebaka sa dimer.Ka hona, haeba likhechana tse holisitsoeng tsa PCR li le nyane, ho khothaletsoa ho sebelisa sistimi ea tšilafalo ea sehlahisoa sa UNG anti-PCR.

3: Li-scavenger tse sebelisoang hangata tsa tšilafalo ea DNA

Li-aerosol li hlahisoa habonolo ha li-pipette li kenngoa, tseo ho leng thata ho li qoba, 'me li tla lula kapele.Ka hona, ha ho pelaelo hore ke khetho e ntle ea ho sebelisa khafetsa DNA tšilafalo scavengers ho thibela ho ata ha tšilafalo ea DNA.

4: Sebelisa tsamaiso ea UNG e khahlanong le tšilafalo

Kamora hore tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR e tlosoe, laboratoring ea liteko e ka sebelisa sistimi ea UNG e khahlanong le PCR ho thibela tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR.Ka lilaboratori tse akaretsang, o ka etsa likarolo tse bonolo tsa liteko, oa arola sebaka sa sehlahisoa sa PCR ka thata ho tsoa libakeng tse ling, ua theha melao le melaoana e itseng ea laboratori, 'me ua tsamaisa koetliso e nepahetseng ho thibela ho hlaha ha tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR.

Litlhahiso: Ho theha laboratori ea PCR e utloahalang, ho boloka tikoloho e ntle ea PCR, ho theha mekhoa e tloaelehileng ea ts'ebetso ea PCR, le ho hlaolela tlhokomeliso e matla ea ts'ebetso ea baetsi ba liteko ke linotlolo tsa ho thibela kapa ho fokotsa tšilafalo ea liteko tsa PCR.