• facebook
  • linkedin
  • youtube

Theha teko ea PCR SOP ho tiisa boitšoaro ba basebetsi ba liteko.

4.1

Mohlahlobi o latela ka tieo lits'ebetso tsa ts'ebetso, 'me o fokotsa tšilafalo ea PCR e ka bakoang ke mabaka a batho kapa e thibelang ho hlaha ha tšilafalo.Ntle le moo, motho ea etsang liteko o lokela ho ba le tsebo le litsebo tse tsamaellanang tsa profeshenale, ho kenyelletsa tsebo ea lisebelisoa tse amanang le ts'ebetso, ho hlakisa ts'ebetso eohle ea mosebetsi, ho tseba mekhoa ea kalafo ea tšilafalo le mekhoa ea taolo ea boleng ba laboratori, le ho khona ho hlalosa sephetho sa liteko ka nepo.

Theha laboratori e tloaelehileng ea PCR.

4.2

PCR laboratori e arotsoe ka likarolo tse 'ne ka molao-motheo, e leng sebaka sa ho lokisa reagent, sebaka sa ts'ebetso ea sampole, sebaka sa amplification, le sebaka sa tlhahlobo ea lihlahisoa tsa amplification.Libaka tse peli tsa pele ke libaka tsa pele ho amplification, 'me tse peli tsa ho qetela ke libaka tsa post-amplification.Sebaka sa pele-amplification le sebaka sa post-amplification li lokela ho aroloa ka thata.Lisebelisoa tsa liteko, li-reagents, pampiri ea ho rekota, lipene, lisebelisoa tsa ho hloekisa, joalo-joalo, li ka phalla feela ho tloha sebakeng sa pele-pele ho ea sebakeng sa morao-rao, ke hore, ho tloha sebakeng sa ho lokisoa ha reagent → sebaka sa ts'ebetso ea mohlala → sebaka sa amplification → sebaka sa tlhahlobo ea lihlahisoa tsa amplification, 'me ha ea lokela ho phalla morao .Phallo ea moea ka laboratoring e boetse e lokela ho phalla ho tloha sebakeng sa pele ho amplification ho ea sebakeng sa post-amplification, 'me e se ke ea phalla morao.Moralo o nepahetseng oa laboratori ea PCR o bontšitsoe ka tlase:

4.3

Setšoantšo sa A: Mokhoa o nepahetseng oa ho seta laboratori ea PCR ka khatello e mpe ka phapusing ea buffer

4.4

Setšoantšo sa B: Mokhoa o nepahetseng oa ho seta laboratori ea PCR ka khatello e ntle ka phapusing ea buffer

Lits'oants'o tsa ho seta laboratori ea PCR tse fanoeng ho Setšoantšo sa A le sa B e lokela ho ba mokhoa o nepahetseng haholoanyane oa ho seta, 'me laboratori e nang le maemo e ka bua ka mokhoa ona bakeng sa moralo.Bakeng sa lilaboratori tse tloaelehileng, ho khothaletsoa hore sebaka sa matlafatso ea PCR le sebaka sa tlhahlobo ea lihlahisoa se ka aroloa, 'me ho buloa ha sekoahelo ho lokela ho fokotsoa ka hohle kamoo ho ka khonehang sebakeng sa ho lokisa sampole le sebakeng sa amplification sa PCR.Hopola: Lihlahisoa le lisebelisoa tsa liteko sebakeng sa tlhahlobo ea lihlahisoa li thibetsoe ka thata ho isoa sebakeng sa ho lokisa sampole le sebaka sa ntlafatso sa PCR.

4.5

Haeba laboratoring e tseba feela le ho tsebahatsa PCR, ho kgothaletswa ho sebedisa fluorescent quantitative PCR ho fapana le PCR e tlwaelehileng.

Liphetho tsa tlhahlobo ea Fluorescence quantitative PCR li ka bokelloa le ho hlahlojoa ka matšoao a fluorescence, ka hona ha ho na tlhoko ea ho bula sekwahelo bakeng sa electrophoresis kamora karabelo, e qobang tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR e bakoang ke ho lutla ha lihlahisoa tsa karabelo ho etsa li-aerosols.Haeba o eketsa palo ea menyetla ea ho bula li-cap nakong ea mohato oa ho kenya gel electrophoresis, ho ka etsahala hore ho be le tšilafalo ea aerosol.Ho khothaletsoa ho khothaletsa ts'ebeliso ea PCR ea palo mme butle-butle e nkele boemo ba PCR.

The UNG anti-PCR sisteme ea tšilafalo e sebelisoa bakeng sa karabelo ea PCR.

Sistimi e sebelisa dUTP sebakeng sa dTTP.Ka mor'a karabelo ea PCR, lihlahisoa tsohle tsa PCR (likaroloana tsa DNA) li kenngoa le dUTP;karolong e latelang ea karabelo ea PCR, enzyme ea UNG e kentsoeng tsamaisong e kenngoa ka 37 ° C metsotso ea 5 pele ho PCR, e ka senyang ka ho khetheha likaroloana tsohle tsa DNA tse nang le dUTP, ebe li etsa PCR reaction.Sena se ka tlosa ka botlalo tšilafalo ea aerosol e bakoang ke lihlahisoa tsa PCR.Phello e bontšoa setšoantšong se ka tlase:

4.6

Tlhokomeliso: Bakeng sa letoto le otlolohileng la PCR, o ka khetha letoto la lihlahisoa tsa anti-PCR silafatso ea sehlahisoa sa Foregene.Hlahisa

Bakeng sa lilaboratori tse etsang liteko tse kholo tsa genotyping, ho khothaletsoa ka matla ho sebelisa sistimi ea tšilafalo ea sehlahisoa sa UNG anti-PCR bakeng sa tlhahlobo ea li-reagents ho kenyelletsa kaho ea lilaboratori tse loketseng.

Khopotso: Ts'ebeliso ea sistimi ena e ke ke ea tlosa tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR e seng e bakiloe.Ka hona, sistimi ea UNG e lokela ho sebelisoa qalong ea tlhahlobo e nepahetseng, 'me sistimi ea UNG e lokela ho sebelisoa bakeng sa ho holisa PCR, e le ho thibela tšilafalo ea lihlahisoa tsa PCR False positive.

Ho khothalletsoa ho sebelisa sistimi ea Direct PCR-UNG ea Foregene ha u etsa liteko tse kholo, joalo ka:

Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;

Plant Seed Direct PCR Kit-UNG;

Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG;

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Letoto lena la lisebelisoa tse tsoang Foregeneha e khone feela ho etsa tlhahlobo ea PCR kapele le ka tekanyo e kholo, empa hape e thibela ka katleho le ho laola tšilafalo ea sehlahisoa sa PCR.


Nako ea poso: Mar-19-2021