Taq DNA Polymerase e bonolo
Tlhaloso ea Kit:
◮Boemo bo phahameng: Enzyme e na le ts'ebetso e itseng ea ho qala ho chesa.
◮Phatlalatso e potlakileng: 10 sec/kb.
◮Template e feto-fetohang haholo: e ka sebelisoa ho holisa boleng bo holimo ba GC, tse fapaneng tse thata ho holisa template ea DNA.
◮Botšepehi bo matla: Taq Enzyme e tloaelehileng makhetlo a 6.
◮Botsitso bo matla ba mocheso: E ka behoa ho 37 ° C ka beke 'me e boloka ts'ebetso e fetang 90%.
Tlhaloso
Foreasy Taq DNA Polymerase ke enzyme e ncha ea Taq e hlahisoang ho baktheria ea boenjiniere ea Escherichia coli ka theknoloji ea ho kopanya liphatsa tsa lefutso.Enzyme ka boeona e na le ts'ebetso e itseng ea ho qala ho chesa 'me e ka sebelisoa bakeng sa PCR e tloaelehileng le qPCR;e na le ts'ebetso ea 5'→3' DNA polymerase le 5'→3' exonuclease, empa ha e na 3'→5' exonuclease.
Likarolo tsa Kit
| Karolo | IM-01011 | IM-01012 | IM-01013 |
| Taq DNA Polymerase e bonolo(5 U/μL) | 5000 U (1 mL) | 50 KU (10 mL) | 500 KU (100 mL) |
| 2 × Taq Reaction Buffer | 25 mL × 5 | 250 di ml × 5 | 500 mL ×25 |
Likarolo le melemo
- Boiphihlelo bo phahameng: Enzyme e na le ts'ebetso e itseng ea ho qala ho chesa.
- Phahamiso e potlakileng: 10 sec / kb.
Template e feto-fetohang haholo: e ka sebelisoa ho holisa boleng bo holimo ba GC, tse fapaneng tse thata ho holisa template ea DNA.
- Botšepehi bo matla: Taq Enzyme e tloaelehileng makhetlo a 6.
- Botsitso bo matla ba mocheso: E ka beoa ho 37 ° C ka beke mme e boloka ts'ebetso e fetang 90%
Sesebelisoa sa Kit
Litsamaiso tse fapaneng tsa PCR/qPCR le litsamaiso tse tobileng tsa PCR
PCR e holisa likaroloana tsa DNA
DNA label
DNA tatelano
PCR A-mohatla
U Tlhaloso
1U: Palo ea enzyme e hlokahalang ho kenyelletsa 10 nmol ea deoxynucleotides ka har'a lintho tse sa keneng ka har'a acid ho sebelisoa DNA ea peō ea salmon e le template / primer bakeng sa metsotso e 30 ho 74 ° C.
Boemo ba ho itšoara
| Mocheso | Nako | Baesekele |
| 37°C | 5 mets | 1 |
| 94°C | 5 mets | 1 |
| 94°C | 10 Mets | 35 |
| 60°C | 10 Mets | |
| 72°C | 20 sec/kb | |
| 72°C | 2 mets | 1 |
Polokelo
-20 ± 5 °C bakeng sa lilemo tse 2 kapa ho -80 °C bakeng sa polokelo ea nako e telele.
Ha ho mats'oao a amplification
1.Taq DNA Polymerase ka har'a kit e lahleheloa ke ts'ebetso ea eona ka lebaka la polokelo e sa lokelang kapa ho fela ha kit.
Keletso: Tiisa maemo a polokelo ea khiti;eketsa hape palo e loketseng ea Taq DNA Polymerase ho sistimi ea PCR kapa u reke Setsi sa PCR sa Nako ea 'Nete e ncha bakeng sa liteko tse amanang.
2.Ho na le li-inhibitors tse ngata tsa Taq DNA Polymerase ho template ea DNA.
Tlhahiso: Hloekisa thempleite hape kapa fokotsa boholo ba thempleite e sebelisitsoeng.
3.Mahloriso a Mg2 + ha a tšoanelehe.
Keletso: Motsoako oa Mg2+ oa 2× Real PCR Mix eo re fanang ka eona ke 3.5mM.Leha ho le joalo, bakeng sa li-primers le litempele tse khethehileng, khatello ea Mg2+ e ka ba holimo.Ka hona, o ka eketsa MgCl2 ka kotloloho ho ntlafatsa mahloriso a Mg2+.Ho kgothaletswa ho eketsa Mg2+ 0.5mM nako le nako bakeng sa ho ntlafatsa.
4.Maemo a amplification a PCR ha a tšoanelehe, 'me tatellano ea pele kapa mahloriso ha aa nepahala.
Tlhahiso: netefatsa ho nepahala ha tatellano ea pele 'me primer ha e so fokotsehe;haeba lets'oao la amplification le sa loka, leka ho theola mocheso o kenang 'me u lokise mahloriso a primer ka nepo.
5.Palo ea template e nyenyane haholo kapa e ngata haholo.
Keletso: Etsa tlhophiso ea template ea linearization gradient, 'me u khethe mohopolo oa template o nang le phello e ntle ka ho fetisisa ea PCR bakeng sa liteko tsa Real Time PCR.
NTC e na le boleng bo phahameng haholo ba fluorescence
Tšilafalo ea 1.Reagent e bakiloeng nakong ea ts'ebetso.
Keletso: Fetola ka lisebelisuoa tse ncha bakeng sa liteko tsa Real Time PCR.
2.Tshireletso e etsahetse nakong ea ho lokisoa ha mokhoa oa ho arabela oa PCR.
Keletso: Nka mehato e hlokahalang ea ts'ireletso nakong ea ts'ebetso, joalo ka: ho roala liatlana tsa latex, ho sebelisa ntlha ea pipette e nang le sefe, joalo-joalo.
3.Li-primers li senyehile, 'me ho senyeha ha li-primers ho tla etsa hore ho be le matla a sa khetheheng.
Tlhahiso: Sebelisa SDS-PAGE electrophoresis ho bona hore na li-primers li senyehile, 'me u li nkele sebaka ka li-primers tse ncha bakeng sa liteko tsa Real Time PCR.
Primer dimer kapa amplification e sa khetheheng
1.Mahloriso a Mg2 + ha a tšoanelehe.
Keletso: Motsoako oa Mg2 + oa 2 × Real PCR EasyTM Mix eo re fanang ka eona ke 3.5 mM.Leha ho le joalo, bakeng sa li-primers le litempele tse khethehileng, khatello ea Mg2+ e ka ba holimo.Ka hona, o ka eketsa MgCl2 ka kotloloho ho ntlafatsa mahloriso a Mg2+.Ho kgothaletswa ho eketsa Mg2+ 0.5mM nako le nako bakeng sa ho ntlafatsa.
2.The PCR annealing thempereichara e tlase haholo.
Tlhahiso: Eketsa mocheso oa PCR ka 1℃ kapa 2℃ nako le nako.
3.Sehlahisoa sa PCR se telele haholo.
Keletso: Bolelele ba sehlahisoa sa Real Time PCR bo lokela ho ba pakeng tsa 100-150bp, eseng ho feta 500bp.
4.Li-primers li senyeha, 'me ho senyeha ha li-primers ho tla lebisa ponahalong ea amplification e khethehileng.
Tlhahiso: Sebelisa SDS-PAGE electrophoresis ho bona hore na li-primers li senyehile, 'me u li nkele sebaka ka li-primers tse ncha bakeng sa liteko tsa Real Time PCR.
5.Sistimi ea PCR ha e ea nepahala, kapa sistimi e nyane haholo.
Tlhahiso: Sisteme ea karabelo ea PCR e nyane haholo e tla etsa hore ho nepahala ha ho lemoha ho fokotsehe.Ho molemo ho sebelisa mokhoa oa karabelo o khothaletsoang ke sesebediswa sa PCR ho etsa teko ea Real Time PCR hape.
Ho pheta-pheta ho fokolang ha boleng ba palo
1.Seletsa ha se sebetse hantle.
Tlhahiso: Ho ka 'na ha e-ba le liphoso pakeng tsa lesoba le leng le le leng la PCR la sesebelisoa, e leng se bakang ho se sebetse hantle nakong ea tsamaiso ea mocheso kapa ho lemoha.Ka kopo, hlahloba ho latela litaelo tsa sesebelisoa se tsamaisanang le sona.
2.Bohloeki ba mohlala ha bo botle.
Keletso: lisampole tse sa hloekang li tla lebisa ho se sebetseng hantle ha teko, ho kenyelletsang bohloeki ba thempleite le li-primers.Ho molemo ho hloekisa template, 'me li-primers li hloekisoa ka ho fetisisa ke SDS-PAGE.
3.Ho lokisa tsamaiso ea PCR le nako ea ho boloka nako e telele haholo.
Tlhahiso: Sebelisa sistimi ea Real Time PCR bakeng sa liteko tsa PCR hang ka mor'a ho itokisa, 'me u se ke ua e tlohela ka thōko nako e telele haholo.
4.Maemo a amplification a PCR ha a tšoanelehe, 'me tatellano ea pele kapa mahloriso ha aa nepahala.
Tlhahiso: netefatsa ho nepahala ha tatellano ea pele 'me primer ha e so fokotsehe;haeba lets'oao la amplification le sa loka, leka ho theola mocheso o kenang 'me u lokise mahloriso a primer ka nepo.
5.Sistimi ea PCR ha e ea nepahala, kapa sistimi e nyane haholo.
Tlhahiso: Sisteme ea karabelo ea PCR e nyane haholo e tla etsa hore ho nepahala ha ho lemoha ho fokotsehe.Ho molemo ho sebelisa mokhoa oa karabelo o khothaletsoang ke sesebediswa sa PCR ho etsa teko ea Real Time PCR hape.
-
Animal Tissue Direct PCR kit (ntle le Sampling ...
-
Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (ntle le Sampl...
-
Animal Tissue DNA Isolation Kit DNA Extraction ...
-
Animal Total RNA Isolation Kit Total RNA Extrac...
-
Cell Total RNA Isolation Kit Total RNA Isolatio...
-
Kakaretso ea Plasmid Mini Kit Kakaretso ea Plasmid DNA Ex...
